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離子色譜-脈沖安培法是近年發展起來的一種糖類物質分析方法，糖類經高效陰離子交換色譜柱分離后在安培檢測器的金電極表面發生氧化反應，引起電流變化而被檢測，避免了衍生過程。該方法具有選擇性好、靈敏度和準確度高的優勢，可以用于半乳糖、葡萄糖、甘露糖等單糖及乳糖、麥芽糖等多糖的測定。影響離子色譜分析準確性的因素很多，色譜條件的變化、檢測器的性能、樣品前處理過程等。色譜條件中包括淋洗液的組成、濃度及PH值，淋洗液的流速;色譜分離柱的影響;檢測器的影響等。使用離子色譜一脈沖安培檢測器檢測乳糖時發現，更換不同色譜柱時，相同濃度的乳糖標樣的峰高及峰面積差別很明顯。推測標樣的響應值是否與出峰時間相關，隨后使用相同的色譜柱，采用相同的流動相比例，只改變其流動相的流速，發現不同流速下相同的乳糖標樣的響應值也有很大差別。說明除了色譜柱的影響之外，流動相的流速也對樣品的響應值有所影響。通用儀器我們是一家專業生產液相色...
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導讀：6月25日，肥胖癥治療藥奧利司他膠囊和軟膏質量標準發布。2021年6月25日，由廣東省藥學會歸口，由中山萬遠新藥研發有限公司、中山萬漢制藥有限公司和中山大學第六附屬醫院等單位共同編寫的T/GDPA3—2021《奧利司他膠囊質量標準》和T/GDPA4—2021《奧利司他乳膏質量標準》團體標準經專家審查通過予以發布，標準自發布之日起實施。據悉，奧利司他膠囊具有長期控制體重的作用，包括減輕體重、維持體重和預防反彈。服用奧利司他膠囊可以降低與肥胖相關的危險因素和與肥胖相關的其它疾病發病率，包括高膽固醇血癥、2型糖尿病，糖耐量低減，高胰島素血癥、高血壓，并可減少臟器中的脂肪含量。奧利司他乳膏由于基質不同，可分為水包油型乳膏劑和油包水型乳膏劑，它和膠囊的主要成分均為奧利司他，化學結構如下：T/GDPA3—2021適用于奧利司他與低聚木糖、低聚果糖、白藜...
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色譜儀是利用混合物在液-固或互不相溶的兩種液體之間分配比的差異，對混合物進行先分離而后分析鑒定的儀器，應用極其廣泛。作為一種高精密儀器，其維護保養工作具有舉足輕重的地位，文章依照流動相流經的順序詳細探討了儀器各組成部分的日常維護保養。做好液相色譜儀的日常維護保養，養成良好的使用習慣，能極大地降低故障率，減少停機和降低維修成本。從液相色譜儀的硬件結構來看，按照流動相經過的順序有以下組成部分：流動相溶劑瓶→高壓泵→進樣器→色譜柱→檢測器→廢液。下面就依照此順序來探討液相色譜儀各部件、各環節在日常使用中需要注意的事項。一、流動相溶劑瓶的保養溶劑瓶是流動相的起點，通常是盛放水相溶液或是有機相溶液。1.水相溶液對于水相溶液來說，首要的問題是防止污染。雖然液相用的水大都經過殺菌處理，但是細菌的生命力很頑強，在適當的溫度和光照情況下，它們就會活躍起來，...
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在高效液相色譜儀中比較常用的硬件配置是四元泵，而四元泵能夠實現同時運行四個通道的流動相，起到這一作用的關鍵部件是四元比例閥，下面簡單介紹一下四元比例閥的工作原理。四元比例閥從結構上看由四個電磁閥拼合在一個立方體的五通閥上，四進一出（四進指ABCD四個通道，一出指從流動相從比例閥流出然后輸送到泵），四元比例閥上有一組供電線，共8小根，每個電磁閥占用2根，工作時，由主板程序控制各電磁閥通電，例如只采用A通道時，軟件中設置A通道100%，此時A電磁閥通電被打開，所連接的流路的流動相可以被泵輸送至液相系統，其余三個電磁閥斷電，所連接流路的流動相不能被泵輸送；若采用雙通道，A60%：B40%，在一個固定周期內通過調節AB電磁閥開關時間來控制流動相比例的，假設這個周期是1min，那么儀器工作時先開0.3minA,再開0.4minB然后再開0.3minA，然后反復循環，當然實際工作中的周期要遠小于1m...
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六通閥進樣器是高效液相色譜系統中最理想的進樣器，它是由圓形密封墊(轉子)和固定底座(定子)組成。雖然六通閥進樣器具有結構簡單、使用方便、壽命長、日常無需維修等特點，但正確的使用和維護將能增加使用壽命，保護周邊設備，同時增加分析準確度。如使用得當的話，六通閥進樣器一般可連續進樣3萬次而無需維修。1、手柄處于Load和Inject之間時，由于暫時堵住了流路，流路中壓力驟增，再轉到進樣位，過高的壓力在柱頭上引起損壞，所以應盡快轉動閥，不能停留在中途。在高效液相色譜系統中使用的注射器針頭有別于氣相色譜，是平頭注射器。一方面，針頭外側緊貼進樣器密封管內側，密封性能好，不漏液，不引入空氣；另一方面，也防止了針頭刺壞密封組件及定子。2、六通閥進樣器的進樣方式有部分裝液法和完全裝液法兩種。使用部分裝液法進樣時，進樣量最多為定量環體積的75％，如20gL的定量環最多進樣15p,L的樣品，并且要求每次進樣體...
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很多離子可用多種檢測方式。例如測定過渡金屬時，可用單柱法直接用電導或脈沖安培檢測器，也可用柱后衍生反應，使金屬離子與PAR或其它顯色劑作用，再用UV/VIS檢測。一般的規律是：對無紫外或可見吸收以及強離解的酸和堿，最好用電導檢測器；具有電化學活性和弱離解的離子，最好用安培檢測器；對離子本身或通過柱后反應后生成的絡合物在紫外可見有吸收或能產生熒光的離子和化合物，最好用UV/VIS或熒光檢測器。若對所要解決的問題有幾種方案可選擇，分析方案的確定主要由基體的類型、選擇性、過程的復雜程度以及是否經濟來決定。離子色譜柱填料的發展推動了離子色譜應用的快速發展，對多種離子分析方法的開發提供了多種可能性。特別應提出的是在pH0-14的水溶液和100%有機溶劑（反相高效液相色譜用有機溶劑）中穩定的親水性高效高容量柱填料的商品化，使得離子交換分離的應用范圍更加擴大。常見的在水溶液中以離子形態存在的離子，包括無...
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液相色譜法，此方法柱效低、時間長（常有幾個小時）。高效液相色譜法是在經典液相色譜法的基礎上，于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發展起來的。它與經典液相色譜法的區別是填料顆粒小而均勻，小顆粒具有高柱效，但會引起高阻力，需用高壓輸送流動相，故又稱高壓液相色譜法，又因分析速度快而稱為高速液相色譜法。也稱現代液相色譜。HPLC鑒于HPLC應用在藥品分析中越來越多，因此每一個藥品分析人員應該掌握并應用HPLC。一、液相色譜理論發展簡況色譜法最早是由俄國植物學家茨維特（Tswett）在1906年研究用碳酸鈣分離植物色素時發現的，色譜法(Chromatography)因之得名。F后來在此基礎上發展出紙色譜法、薄層色譜法、氣相色譜法、液相色譜法二、HPLC的特點和優點HPLC有以下特點：高壓——壓力可達150~300Kg/cm2。色譜柱每米降壓為75Kg/cm2以上。高速&md...
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隨著時代和科技的發展，高效液相等精密分析儀器已普及至與分析測試有關的行業，對實驗水質要求也愈來愈高?，F今高效液相(HPLC)都要求用戶使用超純水定出平坦而沒有波峰的基線以保證分析測試的靈敏度，但有部分HPLC用戶因資金或習慣等原因仍沿用瓶裝飲用純凈水或蒸餾水進行實驗,效果往往不很理想。瓶裝純凈水和蒸餾水均只是普通純水而不是高純水，水中仍含有少量離子和有機物等雜質，用以配制液相和洗脫液不僅可能污堵昂貴的色譜柱，也影響HPLC定出平坦的基線。瓶裝純凈水的純化工藝，通常包括吸附、過濾、反滲透等，對顆粒性有機物的去除效果較好，但對微量有機物的去除卻不能滿足高靈敏度的HPLC實驗之需求，并且，由于其包裝通常多為PVC瓶，透氧率高，同時存在一定的化學溶出量，從而污染瓶中的純凈水，尤其是保存一段時間后，水質下降更多，因此表現在HPLC色譜圖上，雖無特定吸收峰，但基線存在較嚴重的不穩干擾。有專家對重蒸水...
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第一臺離子色譜儀是由H-Small和T-S.Stevens研發的，在分離用的離子交換柱后端加入不同極性的離子交換樹脂填料，該樹脂填料呈氫型或氫氧根型。如陰離子交換柱后端加入氫型的陽離子，交換樹脂填料陽離子交換柱后端加入氫氧根型的陰離子，交換樹脂填料當由分離柱流出的攜帶待測離子的洗脫液在檢測前發生兩個簡單而重要的化學反應，一個是將淋洗液轉變成低電導組分以降低來自淋洗液的背景電導，另一個是將樣品離子轉變成其相應的酸或堿以增加其電導。這種在分離柱和檢測器之間降低背景電導值而提高檢測靈敏度的裝置后來組成獨立組件稱為抑制柱（或抑制器），通過這種方式使電導檢測的應用范圍擴大了。在H-Small等人提議下稱這種液相色譜為離子色譜。離子色譜一經誕生就立即商品化。我國第一臺國產離子色譜儀誕生于1983年，是由中國核工業第五研究所劉開祿研究員帶隊在青島嶗山電子實驗儀器所研制而成。第一臺離子色譜儀成功商品化后，...
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液相色譜儀水相中的溶質溶解方式水相中需溶解的無機鹽和表面活性劑等固體溶質，建議采用加熱法，不建議采用振搖、超聲等方式。因此種方式的溶解，溶質可能處于“臨界膠團濃度”，其后一旦遇到某特殊情形（如遇有機溶劑、溫度劇降等），極易析出少量結晶；而一旦析出，便將損傷儀器和色譜柱，呈現泵頭處析出“鹽和白粉”的現象。流動相的配制與使用1.液相色譜儀恒度洗脫一定是將水相與有機相混合后、抽濾（使用混合型過濾膜），用一個管路（如A管）泵入儀器，這是使用的原則。切勿因節約有機相、便于摸索色譜條件等原因而使用兩個管路（一個純水相、一個純有機相）泵入儀器，即便配制了脫氣機。因此種情形極易造成水相中鹽和表面活性劑的少量析出。剩余流動相完全可繼續使用，密封后放置陰涼處；待下次試驗時與新配制的流動相混合后抽濾即可。無需擔心發霉、無機鹽析出、揮發、比例不準等問題，這些皆為疑...
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高效液相色譜儀的發展現狀對于儀器技術開發方面來說，雖然高效液相色譜儀獲得長足的進步,但與氣相色譜儀相比較而言,高效液相色譜儀的進展還是相對滯后了，發展通用、靈敏、專一的檢測器仍是今后研究探索的重要方向。同時隨著科學技術的迅猛發展,檢測器聯用技術也逐步完善成熟起來。使用單一檢測器,往往難以得到完全的信息，為了在液相色譜一次分離檢測中得到更多、更準確的定性定量信息,除了對現有檢測器利用新出現的技術進行改造以提高性能外,將不同的檢測器聯用是一個可行有效的方法。這樣可以發揮各檢測器的優點,實現在-次色譜進樣分析中得到更多、更準確的信息。20世紀80年代后科學家們開發出了液相色譜與質譜、電感藕合等離子體發射光譜、傅里葉變換紅外光譜原子吸收光譜核磁共振譜等聯用技術。這對于僅限于單一檢測的高效液相色譜儀來說，也是一個新的挑戰和研究點。就高效液相色譜儀器市場來說，在當前的中國高效液相色譜儀市場上，主流...
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很多人對于液相色譜儀中的二元泵四元泵傻傻分不清楚，今天就來好好聊聊兩者的區別。梯度洗脫系統又稱為梯度淋洗或程序洗脫。在同一個分析周期中，按一定程序不斷改變流動相的濃度配比，稱為梯度洗脫。原理：流動相由幾種不同極性的溶劑組成，通過改變流動相中各溶劑組成的比例改變流動相的極性，使每個流出的組分都有合適的容量因子k，并使樣品中的所有組分可在最短時間內實現最佳分離特點：提高柱效改善檢測器的靈敏度。當樣品中的一個峰的k值和最后一個峰的k值相差幾十倍至幾百倍時，使用梯度洗脫效果特別好。梯度洗脫中為保證流速的穩定，必須使用恒流泵，否則難獲重復結果。梯度洗脫常用一個弱極性的溶劑A和一個強極性的溶劑B。二元梯度高效液相色譜儀系統二元梯度高效液相色譜儀系統是一個高壓系統，雙泵并聯，可同時有兩個流動相，按照預先設定的配比進入，再高壓下進行混合，混合配比更準確，不易產生氣泡，不用為了轉換流動相而反復清洗，提高了...
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高效液相色譜法（HighPerformanceLiquidChromatography\HPLC）是色譜法的一個重要分支，應用范圍十分廣泛，對樣品的適用性廣，不受分析對象揮發性和熱穩定性的限制，幾乎所有的化合物包括高沸點、極性、離子型化合物和大分子物質均可用高效液相色譜法分析測定，因而彌補了氣相色譜法的不足。在目前已知的有機化合物中，可用氣相色譜分析的約占20%，而80%則需用高效液相色譜來分析。HPLC具有分離效能高、分析速度快、檢測靈敏度好、能分析和分離高沸點且不能氣化的熱不穩定生理活性物質的特點，已成為化學、醫學、工業、農學、商檢和法檢等學科領域中重要的分離分析技術應用。色譜法的分離原理是：溶于流動相(mobilephase)中的各組分經過固定相時，由于與固定相(stationphase)發生作用(吸附、分配、排阻、親和)的大小、強弱不同，在固定相中滯留時間不...
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