

液相色譜儀的工作原理是利用液體混合物在流動相與固定相中的分配或吸附等差異,由流動相將樣品帶入色譜柱中進行分離,經檢測器檢測并進行數據處理后,根據保留時間和峰面積(峰高)進行定性定量分析。液相色譜儀是化學分析中發展最快、應用最廣的分析儀器,現已廣泛應用于藥品檢驗、產品檢測、農殘檢測等各個方面。我們運用通用GI-3000高效液相色譜儀做過一組實驗,設定流動相流速為1mL/min;選取檢定規程規定的波長254nm作為檢測波長。分別用標準物質及流動相作為樣品進樣,進樣量為10~20μL。結論得出:雜峰不大可能是由雜質引起的,很可能是由所進樣品在色譜管路中的不規則擴散造成的。不規則的擴散使甲醇流動相在進樣后產生了局部的湍流,形成類似于移動的駐波,而這段帶有駐波的流動相在經過檢測器時,對通過檢測池的紫外光產生了干涉作用,使通過檢測池的紫外吸收信號增強。鑒于儀器在進樣時引發信號波動,而這些波動對測量結果會產生干擾,因此,可以考慮把進樣干擾作為液相色譜儀性能評價的一項指標,這有助于引導相關液相色譜儀的生產研發單位對儀器的結構加以改進,降低或消除此類干擾,從而提升儀器的計量性...
液相色譜儀是一款重要的精密儀器,在買際使用過程中,液相色譜儀經常發生各種故障,直接影響了其精密度,因此應特別注意液相色譜儀故障問題,采取科學、有效的處理措施,及時消除故障隱患,恢復其良好使用性能。1.高壓輸液系統故障:高效液相色譜儀運行過程中高壓泵是其動力來源,高壓泵工作不穩定,往往會造成流量相抽取量反復變化,系統壓力變化較大,直接影響了高效液相色譜儀測定結果的準確性。高壓泵常見故障主要有柱塞桿磨損、密封圈滲漏和泵頭有氣泡。
壓力過高是高效液相色譜儀在使用中最常見的問題,一般都是由于流路中有堵塞造成的。此時,我們應該分段進行檢查。大多數情況下壓力偏高是由色譜柱引起的,為排除此原因,應先將色譜柱甩開,將色譜柱入口處管路卸開接一空燒杯,以1ml/min流速送液,此時壓力應在0.5MP以下,若此時壓力較大,應作進一步判斷。拆掉管道過濾器(位置在排液閥上方)上方與手動進樣閥的連接管路,用扳手將管道過濾片拆下,送液確認此時的壓力,若壓力明顯下降,說明管道過濾片堵塞,放入燒杯加入異丙醇進行超聲清洗即可;若壓力仍然偏高,說明仍有堵塞的地方,可能位置為單向閥或吸濾頭,可先將吸濾頭取下,將送液管直接插入流動相中送液,觀察壓力變化以排除吸濾頭是否堵塞,若不是,則應對入口單向閥和出口單向閥進行清洗,燒杯中倒入異丙醇,將單向閥垂直放入(若橫向放置有可能將單向閥內部部件超散)進行超聲清洗,若用戶經常使用緩沖鹽,用60-70度的熱水進行超聲清洗效果更佳。若用戶配有梯度系統,那么連接兩臺送液泵的混合器也是一個容易堵塞的地方,將混合器拆開,在個頭較大的六方形金屬件后方有一個頭較小的類似螺帽的東西,拆開后可以看到一個很小的過濾篩板,對此部件進行超聲清洗即可。
保留時間不重現有兩種不同的情況:即保留時間漂移和保留時間波動。前者是指保留時間僅沿單方向發生變化,而后者指保留時間無固定規律的波動。將此兩種情況區分開來對找到問題的原因往往很有幫助。如,保留時間的漂移往往由柱老化引起;而柱老化不可能引起保留時間的無規律波動。事實上,保留時間漂移的多半原因是不同機理的色譜柱老化,如固定相流失(例如通過水解),色譜柱污染(由樣品或流動相所致)等。
液相色譜儀可應用于生物化學、生物醫學、環境化學等方面的分析研究。隨著現代醫學的發展,采用液相色譜法進行生物技術研究已經成為一種常規方法。鑒于此,針對應用液相色譜法進行生物技術研究時出現的常見問題進行分析,并提出合理的解決辦法。隨著現代醫學的發展,采用液相色譜法進行生物技術研究已經成為一種常規方法。目前,在生物化學、生物醫學、環境化學等實驗室均配備液相色譜儀等先進大型儀器,但是在操作者使用過程中儀器往往會出現不同的問題,亟待解決。鑒于此,以下針對應用液相色譜法進行生物技術研究時出現的常見問題進行分析,并提出合理的解決辦法。
1、液相氘燈主要產生190~400nm波長范圍的紫外光。主要是依靠等離子體放電(就是指始終讓氘燈處于一個穩定的氘元素(D2或者重氫)電弧狀態下。低于190nm波長的紫外光難以被使用的原因是其波長段被氘燈外部的石英套所吸收。2、氘燈的開關次數與其正常使用時間成反比。建議:最好在需要關燈4小時以上才關燈。以每日工作8小時來說,如果在期間不關燈的話,那你的氘燈壽命會下降三成。
隨著科學技術的發展,液相色譜儀在化學分析工作中扮演了越來越重要的角色。液相色譜儀主要由貯液瓶、輸液泵、進樣器、色譜柱(包括柱溫箱)、檢測器和數據記錄及處理裝置組成。液相色譜儀的進樣器可分為自動進樣器和手動進樣器兩大類型。目前,手動進樣器絕大多數都采用六通閥(見圖1)。六通閥的優點是進樣量可變范圍大,進樣量也較大,分析和制備通用;進樣量由固定體積的定量管或微量注射器控制,重復性好,可達0.5%;耐高壓,可直接在高壓下把樣品送入色譜柱,不需停流;如果裝上電動或氣動的驅動裝置,可做到自動化進樣。
1、進樣器:平時應該注意使用二次蒸餾水和甲醇在裝載狀態及進樣分析狀態清洗;如果出現漏液現象,原因極可能為轉子密封墊磨損或污染,一般要申請維修或更換配件。2、排液閥:此處不能完全密封或漏液時一般是其中的墊片污染或磨損,可卸下后取出其墊片用異丙醇超聲波清洗或更換墊圈。3、單向閥:如遇到泵壓不穩或流動相不能抽取,則可能是單向閥出現問題,卸下用異丙醇超聲波清洗,清洗時須按其安裝的方向放置在小燒杯中,切記不可與安裝方向倒置超洗!4、工作站:出現死機可重起計算機;不正常運行時,首先可更換電腦測試其硬件故障;或在本機上重新插拔接口、重新安裝軟件。5、過濾器:(GI通用液相色譜儀)當色譜峰出現異常情況時,有可能是此部件被污染,拆下用異丙醇超洗或更換過濾墊片。6、吸濾頭:特殊情況下可拆下濾頭抽取以判斷其中是否堵塞;亦可用注射器吸取流動相通過吸濾頭打出以判斷其是否堵塞。若有堵塞情況可用異丙醇超聲波清洗;清洗不成功則需要更換。7、流動相的抽作要求:高效液相級色譜醇,二次蒸餾水,緩沖鹽一定要過濾...
幾乎所有液相色譜儀接頭故障都是可以避免的,按下列要求可以有效地預防接頭的故障。1、使用液相色譜儀儀器設計時的部件不同廠家連接管伸出刃環的長度不完全相同,混用容易導致漏液、螺紋損壞、色譜柱進出口及檢測器進液口螺母破壞等,連接管在螺母中沒有良好密封也會導致漏液、死體積增加等。建議最好不要互換使用不同廠家生產的接頭和刃環。2、按要求組裝和擰緊接頭,不可擰得過緊低壓接頭的故障主要有接頭松動、管頭損壞、螺紋“滑絲”、擰過頭。低壓接頭用手上緊,加上鎖緊螺絲可減少以上故障的發生,一旦發現低壓接頭損壞,應重新換新的。高壓接頭的故障與低壓接頭差不多,污染和裝置不當也常有發生。3、使用合適的工具在擰緊接頭的時候一定要仔細,過緊可能會損壞螺紋、刃環等,引起漏液,最糟糕的是會使接頭斷在螺母內部。使用手擰緊接頭,不需要任何工具就可以密封。旋緊接頭時最好要用死扳手,不用活扳手,保證不損壞接頭。4、接頭的清潔組裝與拆卸接頭時要檢查在密封面上有無微粒和無機鹽晶體。這些污染物影...
溶劑與酒不同,它隨著時間的推移會降解。近年來,新分析技術的出現及低檢測波長和檢測限使得溶劑穩定性問題變得突出。它包括三個方面:(1)降解產物會影響分析;(2)溶劑中加入的穩定劑會影響分析;(3)若溶劑降解產物具有高度活性或毒性,安全則成為一個應考慮的因素。廠家在許多溶劑中加入穩定劑以防其降解,使用者可在含穩定劑、不含穩定劑、一種溶劑含不同穩定劑間作出選擇。一些溶劑不需要穩定劑,另一些在特定應用時沒有合適的穩定劑,本文討論了幾種常用的、易降解的并可加穩定劑防降解的溶劑。1、氯代烷含氯溶劑如氯仿和二氯甲烷被廣泛應用于氣相色譜和正相液相色譜中。降解的容易性和速度依賴于溶劑的類型和貯存條件。廠家在其中加入穩定劑以提高溶劑穩定性并適于常規應用。含氯溶劑易于發生下列自由基反應:光、熱、氧氣可引發自由基反應產生降解產物如光氣、氯化氫和低聚物,但可向溶劑中加入穩定劑阻礙此分解過程,如醇和烯烴是現今很有效的和使用特別廣泛的穩定劑。烯烴充當自由基捕獲劑并能去除降解產物(如氯化氫)。較高濃度(1%)的醇可阻止氯...